생물 발광 유도용 재조합 플라스미드
기본 정보
기술 내용
요약
본 발명은 포토박테리움 포스포리움(Photobacterium phosphoreum) 유래의 루마진 단백질을 코딩하는 유전자; lux L 프로모터 또는 lux C 프로모터; 및 고초균(Bacillus subtilis) 유래의 돌연변이된 리보플라빈 오페론을 포함하는 생물 발광 유도용 재조합 플라스미드, 이를 형질 전환한 형질 전환체 및 이를 이용한 생물의 발광을 분 석하는 방법에 관한 것이다.
기술 개요
생물 발광 유도용 재조합 플라스미드를 형질 전환한 형질 전환체 및 이를 이용하여 생물의 발광을 분석하는 방법에 관한 기술임
기술 분야
본 발명은 포토박테리움 포스포리움(Photobacterium phosphoreum) 유래의 [0001] 루마진 단백질을 코딩하는 유전자; lux L 프로모터 또는 lux C 프로모터를 발현하는 유전자; 및 고초균(Bacillus subtilis) 유래의 돌연변이된 리 보플라빈 오페론을 포함하는 생물 발광 유도용 재조합 플라스미드, 이로부터 형질 전환된 형질 전환체 및 이를 이용한 생물의 발광을 분석하는 방법에 관한 것이다.
해결하고자 하는 과제
본 발명은 상기의 문제를 해결하기 위해 안출된 것으로, 이에 본 발명자들은 [0009] 발광하는 대장균을 연구하던 중, 포토박테리움 포스포리움(Photobacterium phosphoreum) 유래 루마진 단백질의 N 말단 절반 부위를 암호화하는 유전자(N-Lump), 루마진 단백질 유전자의 과다 발현을 유도하기 위해 상기 균 유래 lux L 프로모터 또는 lux C 프로모터, 및 루마진 리간드인 6,7 다이메틸 8-리비틸루마진(6,7-dimethyl 8-ribityllumazine)이 과다 생산하 는 고초균(Bacillus subtilis) 유래의 돌연변이된 리보플라빈 오페론를 포함하는 재조합 플라스미드 (recombinant plasmid)를 제조한 뒤, 이를 대장균에 형질 전환하면, 대장균이 발광한다는 사실을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
효과
본 발명의 포토박테리움 포스포리움(Photobactedium phosphoreum) 유래의 루마진 단백질 유전자; lux C 또는 lux L 프로모터; 및 고초균 (Bacillus subtilis) 유래의 돌연 변이된 리보플라빈 오페론을 포함하는 생물 발광 유도용 재조합 플라스미드를 대장균에 형질 전환하면, 야생형 대장균의 형광 강도의 약 2 내지 약 500배로 증가 하는 효과가 있다. 이를 이용하여 세포내에서 동력학을 연구하는데 쓰일 표지 단백질을 발굴할 수 있는 효과가 있다.
적용 분야
바이오(분자) 영상, 표지 미생물, 생체발광 분석
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