역전사를 사용하지 않는 결찰 방법을 이용한 cDNA 합성 기반 표적 유전자 검출용 조성물 및 다중 결찰 보조 재조합효소 중합효소 증폭 방법
기본 정보
기술 내용
요약
본 발명은 역전사를 사용하지 않는 결찰 방법을 이용한 cDNA 합성 기반 표적 유전자 검출용 조성물 및 다중 결찰 보조 재조합효소 중합효소 증폭 방법에 관한 것으로, 역전사 효소를 이용한 cDNA의 합성 없이 실온에서 30분 내 외의 짧은 반응 시간만으로도 시각적 변화를 통하여 표적 유전자를 검출할 수 있으므로, RNA 바이러스 등의 현장 유전자 분자 진단에 유용하게 활용될 수 있다.
기술 개요
역전사를 사용하지 않은 결합방법을 이용한 cDNA의 합성 및 분자 진단
기술 분야
본 발명은 역전사를 사용하지 않는 결찰 방법을 이용한 cDNA 합성 기반 표적 [0001] 유전자 검출용 조성물 및 다중 결 찰 보조 재조합효소 중합효소 증폭(mLig-RPA) 방법에 관한 것이다.
해결하고자 하는 과제
[0007] 본 발명의 하나의 목적은 표적 유전자의 일부 염기서열과 상보적인 복수개의 주형 서열; 리가아제(ligase); 고 리매개 등온증폭(loop-mediated isothermal amplification) 시약; 및 고리매개 등온증폭용 프라이머 세트를 포 함하고, 상기 복수개의 주형 서열이 모두 결찰(ligation)될 경우 상기 표적 유전자 전체 염기서열과 상보적인 것인 표적 유전자 검출용 조성물을 제공하는 것이다 [0008] 본 발명의 다른 목적은 피검체로부터 생물학적 시료를 수득하는 단계; 상기 시료에 표적 유전자의 일부 염기서 열과 상보적인 복수개의 주형 서열 및 리가아제(ligase)를 첨가하여 주형 서열의 다중 결찰(multiple ligatio n)을 수행하는 단계; 상기 다중 결찰된 주형 서열의 증폭 반응을 수행하는 단계; 및 상기 주형 서열의 증폭 반 응이 확인될 경우, 상기 피검체에 상기 표적 유전자가 존재하는 것으로 결정하는 단계를 포함하는 피검체로부터 표적 유전자의 존재 여부를 결정하기 위한 정보제공방법을 제공하는 것이다.
효과
[0042] 역전사를 사용하지 않는 결찰 방법을 이용한 cDNA 합성 기반 표적 유전자 검출용 조성물, 및 표적 유전자의 존 재 여부를 결정하기 위한 정보제공방법에 따르면, 역전사 효소를 이용한 cDNA의 합성 없이 실온에서 30분 내외 의 짧은 반응 시간만으로도 시각적 변화를 통하여 표적 유전자를 검출할 수 있으므로, RNA 바이러스 등의 현장 유전자 분자 진단에 유용하게 활용될 수 있다.
적용 분야
질병진단 키트, 분자진단
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